Metodutveckling för framtidens diagnostik av malignt melanom via tape-strips: En metodundersökning med icke-invasiva provtagningar
2021 (Swedish)Independent thesis Basic level (degree of Bachelor), 10 credits / 15 HE credits
Student thesisAlternative title
METHOD DEVELOPMENT FOR THE FUTURE DIAGNOSIS OF MALIGNANT MELANOMA WITH TAPE-STRIPS : A METHOD STUDY WITH NON-INVASIVE SAMPLING (English)
Abstract [sv]
Malignt melanom är den mest invasiva hudcancerformen och dagens aktuella diagnostik bygger på kirurgiska invasiva provtagningar som kan uppfattas som skrämmande för patienten. Därför undersöktes en icke invasiv provtagningsmetod vid namnet pigmented lesion assay (PLA) som bygger på en provtagning med hjälp av tejp-strips (D100 - D-Squame Standard Sampling Discs). Huden består av tre lager, epidermis, dermis och subcutis där varje lager varierar avsevärt i sin anatomi och funktion. Epidermis är det yttersta hudlagret och cellinnehållet består främst av keratinocyter och melanocyter. Melanom är en typ av hudcancer som uppkommer när melanocyter, vilkas funktion är att utveckla pigment i huden börjar att växa okontrollerat. Genom tejp-metoden sker det ett utbyte mellan epidermiscelltyperna och tejpen, antalet tejp-strips som applicerades på de 10 frivilliga deltagarna var sammanlagt 5 där de två första kasserades för att minimera bakteriell kontamination. Efter provtagningen utfördes en RNA-isolering på uppsamlade tejp-strips och sedan utfördes en cDNA-syntes. För att upplysa metodens funktion utfördes en realtids polymerase chain reaction (RT-PCR) analys på deltagarprover för amplifiering av normalgenen filaggrin hos de friska deltagarna. Resultatet visade att PLA-analysen är möjlig för detektion av intressanta gener. Gener som är melanomrelaterade är LINC, PRAME och CIMP och amplifierades på inköpta melanomceller för kontroll av metoden i jämförelse med kontrollgener ACTB och GAPDH.
Abstract [en]
Malignant melanoma is the most invasive form of skin cancer and today's current diagnosis is based on surgical invasive sampling that can be perceived as frightening for the patient. Therefore, a non-invasive sampling method called Pigmented lesion assay (PLA) was investigated which is based on a sampling using tape-strips (D100 - D-Squame Standard Sampling Discs). The skin consists of three layers, the epidermis, dermis and subcutis, where each layer varies considerably in its anatomy and function. The epidermis is the outermost layer of the skin and the cell contents consist mainly of keratinocytes and melanocytes. Melanoma is a type of skin cancer that occurs when melanocytes, whose function is to develop pigment in the skin, begin to grow out of control. Through the tape method, there is an exchange between the epidermal cell types and the tape, the number of tape-strips applied to the 10 voluntary participants was a total of 5 where the first two were discarded to minimize bacterial contamination. After sampling, an RNA isolation was performed on collected tape-strips and then a cDNA-synthesis was performed. To elucidate the function of the method, a real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis was performed on participant samples for amplification of the normal gene filaggrin on the healthy participants. The results showed that the PLA analysis is possible for the detection of interesting genes. Genes that are melanoma-related are LINC, PRAME and CIMP and was amplified on purchased melanoma cells for control of the method in comparison with control genes ACTB and GAPDH.
Place, publisher, year, edition, pages
2021. , p. 26
Keywords [en]
Epidermis, Keratinocytes, Malignant Melanoma, Melanocytes, Pigmented lesion assay, Real-Time polymerase chain reaction.
Keywords [sv]
Epidermis, Keratinocyter, Malignt melanom, Melanocyter, Pigmented lesion assay, Realtids polymerase chain reaction.
National Category
Medical and Health Sciences
Identifiers
URN: urn:nbn:se:mau:diva-43283OAI: oai:DiVA.org:mau-43283DiVA, id: diva2:1564622
Educational program
HS Biomedicinsk laboratorievetenskap
Supervisors
Examiners
2021-06-282021-06-112021-06-28Bibliographically approved