Optimering av cellstimulering och western blot protokoll för ZAP-70 avseende fosforylering av Y492 & Y493.
2021 (Swedish)Independent thesis Basic level (degree of Bachelor), 10 credits / 15 HE credits
Student thesisAlternative title
Optimization of cell stimulation and western blot protocol for ZAP-70 regarding phosphorylation of Y492 & Y493. (English)
Abstract [sv]
ZAP-70 är ett proteinkinas, i gruppen Syk, som förekommer i cytoplasman hos T-celler där den spelar en stor roll i T-cellsaktivering, proliferering och differentiering. Den kan även finnas i leukemiska T-och B-celler hos patienter med leukemi. Patienter med uttryck av ZAP-70 som lider av kronisk lymfatisk leukemi (KLL) har sämre prognos. ZAP-70 kan användas som biomarkör vid diagnostisering av KLL. I förlängningen kan molekylärt präglade polymerer (MIP) som framställts ge en prisvärd och stabil diagnostiseringsmetod. Projektet fokuserar på fosforylering av tyrosinsätena Y492 och Y493. Dessa har en inhiberande respektive aktiverade roll vid T-cellsaktivering. I projektet användes JURKAT T-leukemiceller som stimuleras med anti-CD3 antikroppar, H2O2, samt en kombination av de båda. Cellysatet användes i en SDS-PAGE varefter gelen blottas med western blot. Fosforylering av Y492 kunde påvisas där bäst effekt gavs av kombinationen anti-CD3 antikroppar och H2O2. Fosforylering av Y493 kunde påvisas men ingen ökat fosforylering kunde detekteras jämfört med icke stimulerade celler.
Place, publisher, year, edition, pages
2021. , p. 20
Keywords [en]
cell stimulation, chronic lymphocytic leukemia, phosphorylation, western blot, Y492, Y493, ZAP-70
Keywords [sv]
cellstimulering, kronisk lymfatisk leukemi, fosforylering, western blot, Y492, Y493, ZAP-70
National Category
Biomedical Laboratory Science/Technology
Identifiers
URN: urn:nbn:se:mau:diva-43900OAI: oai:DiVA.org:mau-43900DiVA, id: diva2:1570444
Educational program
HS Biomedicinsk laboratorievetenskap
Supervisors
Examiners
2021-06-282021-06-212021-06-28Bibliographically approved